你知道含量试剂盒怎么用吗？

　　含量试剂盒提供了一种简单方便的方案检测样品中亚铁和/或铁离子。检测时，载铁蛋白在酸性缓冲液中把高价铁溶解溶液里。然后将其还原成亚铁离子，FereneS与铁反应产生一种稳定的化合物，593nm处有吸收峰。缓冲液中有一种特殊的螯合物消除Cu2+的干扰。试剂盒检测线性范围为50ul样品中0.4-20nmol，或者铁浓度在8uM-400uM之间的各种生物样品。

 

　　铁是动物和人体生长发育所必需的微量元素之一。其在机体中参与机体能量代谢、载体组成、转运和贮存营养素及机体免疫机能，是机体生化反应中多种酶的重要组分及活化因子。铁在体内主要以金属络合蛋白、亚铁血红素以及载氧蛋白的形式存在。无机铁也参与到氧化还原反应中许多酶的铁硫簇里，比如固氮酶和氢化酶。

 

　　含量试剂盒操作步骤：

 

　　1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

 

　　2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

 

　　3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

 

　　4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

 

　　5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

 

　　6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

 

　　7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。