含量试剂盒实验溶液配置步骤

　　含量试剂盒中亚硫酸钠能够还原Fe3+为Fe2+，Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色，产物在520nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可定量检测铁的含量。

 

　　ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。

 

　　HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰，NADPH和ATP含量成正比，以此反应ATP含量。

 

　　溶液的配制：

 

　　1.提取液低温条件下，可能有结晶析出，放于60℃水浴加热溶解即可，不影响使用。

 

　　2.试剂二：临用前加入7mL蒸馏水充分溶解，可加热促进溶解；

 

　　3.试剂四：临用前取1支加入0.2mL蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；

 

　　4.试剂五：临用前加入3.2mL蒸馏水充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；

 

　　5.试剂六：临用前取1支加入0.25mL蒸馏水备用，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；

 

　　6.标准品：5mgATP。临用前加入0.826mL蒸馏水配成10μmol/mL的ATP标准溶液，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；

 

　　7.工作液的配制：临用前请按试剂二(mL)：试剂三(mL)：试剂四(mL)：试剂五(mL)：试剂六(mL)=1：1：0.1：0.4：0.1的比例配制（2.6mL，约10T的量），现配现用。